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技術文章 / article
DMEM高糖,含谷氨酰胺和丙酮酸鈉的特點
2022-11-30 瀏覽次數:963
背景及概述
培養基是為適合生物生長所需要的人工配制的混合物質養料。常指培養微生物或生物細胞組織的養料,主要用于微生物的分離、培養、鑒定、保藏和釀造、發酵等方面。具體成分根據生物營養需要而不同。一般含有水、碳水化合物、含氨物質和礦質鹽類等。按所用原料不同可分為兩類:應用化學藥品配成并標明成分的,稱為合成培養基或綜合培養基,應用肉湯、馬鈴薯汁等天然成分配成,稱為天然培養基。又因加入或不加入賦形劑可分為固體培養基、半固體培養基和液體培養基。
特點
DMEM(Dulbecco'sModifiedEagleMedium)培養基是在MEM培養基的基礎上研制的,與MEM培養基相比,氨基酸的含量增加了2倍,維生素增加了4倍,同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及丙酮酸鈉。DMEM培養基最初設計葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),后來又發展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型),現已廣泛應用于各種細胞的培養,不含葡萄糖的DMEM培養基可以根據研究需要,隨意調節葡萄糖的濃度,方便快捷。DMEM高糖,含谷氨酰胺和丙酮酸鈉含有高糖(4500mg/L)、谷氨酰胺(584mg/L)、酚紅(15mg/L)及丙酮酸鈉(110mg/L)。在DMEM高糖,含谷氨酰胺和丙酮酸鈉中成功培養的細胞包括原代成纖維細胞,神經元,神經膠質細胞,HUVEC和平滑肌細胞,以及細胞系如HeLa,293,Cos-7和PC-12。DMEM高糖,含谷氨酰胺和丙酮酸鈉與其他媒體不同,因為它含有的氨基酸和維生素濃度是原始Eagle的MinimalEssentialMedium的4倍。DMEM最初用低葡萄糖(1g/L)和丙酮酸鈉配制,但通常與較高葡萄糖水平一起使用,有或沒有丙酮酸鈉。DMEM不含蛋白質,脂質或生長因子。因此,DMEM需要補充,通常需要10%(FBS)。DMEM使用碳酸氫鈉緩沖系統(3.7g/L),因此需要5-10%的CO2環境來維持生理pH。